骨组织脱钙方法标准操作规程

1、目的

规范骨组织脱钙的技术操作。

2、操作规程

2.1 5%硝酸脱钙法 将在甲醛中充分固定的骨块或含钙的组织置于5%硝酸溶液中脱钙。每日早晚各更换一次新溶液，直至可用针刺入骨组织无阻力感为止。一般需1-3天，如脱钙仍不够，可适当延长时间，但将会影响染色。

用流动自来水冲洗24-48h，以后可进行常规石蜡包埋。

2.2 甲酸-枸橼酸脱钙法

应用时取甲、乙两液等量混合，每天换液一次。脱钙后水冲洗4-8h。脱钙容器底部可放一层离子交换树脂，能够吸收释出的钙质。

2.3 Bouin液（包音氏液）配制法

取苦味酸饱和溶液75ml，倾入瓶内，再取福尔马林原液25ml倾入上述瓶内，将两者混匀，然后加入5ml冰醋酸，充分混匀，即可应用。实验动物小块骨组织脱钙适用，组织块脱钙固定12-72h后，经流水洗12h，或不经水洗可直接投入纯酒精中脱水再选取组织块，不妨碍染色。

2.4 5%～6%甲酸脱钙

将需要钙的骨标本置于甲酸脱钙液中，液体应为组织标本体积的10倍左右，脱钙一段时间后可摇荡1~2次，必要时换一次新溶液，脱钙直至可用针刺入骨组织无阻力感为止。大鼠胸骨脱钙48~72小时，犬胸骨脱钙72~96小时。脱钙完毕用水洗24小时后，放回固定标本瓶中。

3、附表

附表1骨组织脱钙记录表