组织标本脱水、透明与浸蜡的操作规程

1、目的

规范实验动物组织标本脱水、透明及浸蜡的技术操作。

2、 操作规程

2.1 脱水 固定的组织经取材、修块后，水洗，即可进入组织脱水过程。一般乙醇的浓度从70%或80%开始，再经90%、95%Ⅰ、95%Ⅱ、无水乙醇Ⅰ和无水乙醇Ⅱ，即可达到脱水的目的。但是，有时为了某种特殊的要求，例如要做糖元染色或尿酸结晶染色的切片标本，为了防止糖元或尿酸结晶在水中消失，就要直接投入无水乙醇中固定。但是，组织块在纯乙醇中放置的时间不宜过久，以防组织过度硬化而造成切片困难。

2.2 透明 组织脱水后，还要经过一个浸蜡的媒剂透明过程，目的是使石蜡渗入到组织中去，达到包埋的支持作用。病理技术室最常用的透明剂是二甲苯。它既能与乙醇混合，又是石蜡的溶剂。故组织脱水后，直接投入到二甲苯中能使组织透明，但同时又能引起组织收缩和硬化变脆。因此组织块在二甲苯溶剂的时间不宜过长，一般10-30min左右为宜。

2.3 浸蜡 组织经过透明后，移入熔化石蜡内浸渍，称之浸蜡。用作浸蜡的石蜡其熔点一般要求在52-58℃之间。而实际应用时，应以制片时气候和室温为根据，作适当调节。在夏季，宜采用熔点较高的石蜡。在冬季，应采用熔点较低的石蜡。这些选择有利于切片的制作。浸蜡时间长短要依据组织块的大小和组织种类、温度高低来具体制定。浸蜡时间不宜过长，过长可造成组织脆硬，致使切片破裂。浸蜡时间过短，造成浸蜡不足，也难切成完好的切片。实验动物组织一般浸蜡时间，在三步石蜡中总共放置3.5～4.5h。

3、附表

附表1组织标本脱水记录表。