冰冻切片的制作标准操作程序

1、目的

规范制作冰冻切片的操作程序。

2、操作规程

2.1 打开冰冻切片机，待箱内温度下降到-25℃，打开观察窗, 从速冻台上取出组织固着器，放少量O.C.T，待冻结后将组织块放上，并在组织周围加适量O.C.T后放入切片机内。待组织冻结后，将组织固着器装到切片机上，调整组织的切面与刀刃平行并贴近刀刃，将厚度调整到适当位置后，关闭观察窗，初步修出组织切面后，放下防卷板，开始切片。切出切片后用载玻片贴附，根据需求处理切片。如需要HE染色时必须快速固定后水洗。

2.2 Harris苏木精液 3～5 min。

2.3 自来水洗。

2.4盐酸乙醇液（1%盐酸，75%酒精）分化数秒钟。

2.5 自来水洗。

2.6 流水冲洗5min至细胞核呈蓝色。

2.7 0.5%伊红水溶液1min。

2.8 95%乙醇脱水2次1min/次。

2.9 无水乙醇脱水2次1min/次。

2.10 二甲苯透明2次1min/ 次。

2.11 中性树胶封固。

3、附表

附表1组织标本冰冻切片记录表。