基因组学之单细胞测序
基因组研究包括两方面的内容:以全基因组测序为目标的结构基因组学(structural genomics)和以基因功能鉴定为目标的功能基因组学(functional genomics),又被称为后基因组(postgenome)研究,是系统生物学的重要方法。 在医学领域,基因组学能为一些疾病提供新的诊断、治疗方法,有助于医生获得更多的治疗信息并进行个性化医疗。在食品、农业、环境等研究领域,基因组
基因组研究包括两方面的内容:以全基因组测序为目标的结构基因组学(structural genomics)和以基因功能鉴定为目标的功能基因组学(functional genomics),又被称为后基因组(postgenome)研究,是系统生物学的重要方法。
在医学领域,基因组学能为一些疾病提供新的诊断、治疗方法,有助于医生获得更多的治疗信息并进行个性化医疗。在食品、农业、环境等研究领域,基因组学的应用也十分广泛。基因组学的主要工具和方法包括生物信息学,遗传分析,基因表达测量和基因功能鉴定。
一、单细胞测序:
单细胞测序通过对单个细胞进行基因组或转录组测序,解决了用组织样本无法获得不同单个细胞的异质性信息、样本量太少无法进行常规测序的难题,为科学家研究解析单个细胞的行为、机制、与机体的关系等提供了新方向,为早期检测、诊断疾病及疾病的个体化治疗提供指导。
二、实验路线:
(1)材料选取;
(2)DNA样品单细胞或0.5pg-1ng基因组DNA≥0.6ug;
(3)文库构建180-280bp;
(4)PE150测序;
(5)生物信息学分析。
三、生物信息学分析:
四、应用领域:
疾病早期诊断(检测),疾病(癌症)发生机制。
五、样品要求:
(1)DNA水平:单个细胞,单染色体,少量细胞等稀有样本或0.5 pg的基因组DNA。
(2)RNA水平:单个细胞,微量细胞(几个到几千个)和微量Total RNA(10pg-10ng)中含polyA尾的RNA。
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转录组常见问题解答
一、什么是转录组? 转录组(transcriptome)广义上指某一生理条件下,细胞内所有转录产物的集合,包括信使RNA、核糖体RNA、转运RNA及非编码RNA;狭义上指所有mRNA的集合。 二、RNA-seq中什么是有参/无参?如何选择? 参是指参考基因组;一般还未有参考基因组的物种建议做无参,或者测序样本与参考基因组比对率过低也可以做无参。 三、什么是raw d