石蜡切片免疫组织化学染色直接法

本文档详细介绍了石蜡切片免疫组织化学染色直接法的标准操作流程,包括试剂准备、切片脱蜡、抗原修复、一抗孵育、DAB显色、复染及封片等关键步骤,适用于病理实验室规范化操作。

石蜡切片免疫组织化学直接法DAB显色SOP

#石蜡切片免疫组织化学染色直接法

1、目的

规范石蜡切片免疫组织化学直接法染色的操作规程和方法。

2、操作程序

2.1 切片常规脱蜡至水。

2.2 3%H2O2孵育10分钟。

2.3 蒸馏水洗3分钟,3次。

2.4 抗原修复液进行抗原修复1-2次(用微波炉)。

2.5 0.01% mol/L PBS 洗3分钟,3次。

2.6 山羊血清封闭,室温20分钟。倾去多余液体,勿洗(有时可省此步)

2.7 抗原修复液I滴加在切片上室温6分钟。

2.8 0.01% mol/L PBS 洗3分钟,3次。

2.9 滴加酶标抗体工作液,37℃ 30分钟。

2.10 用0.01% mol/L PBS配制的0.1% TWEEN-20 液洗5分钟,3次。

2.11 DAB显色,5-10分钟。

2.12 苏木素轻染20秒,分化10秒。

2.13 脱水、透明和封片。