原代细胞分离培养与处理

实验介绍：

凡是来源于胚胎、组织器官及外周血，经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。分离的原代细胞有两种类型：贴壁细胞（锚定依赖性生长）和悬浮细胞（锚定非依赖性），贴壁细胞多来自器官组织，而悬浮细胞多来自血液系统的细胞。原代细胞的培养也叫初代培养是从供体取得组织细胞在体外进行的首次培养，是建立细胞系的第一步，是一项基本技术。

原代细胞或细胞系培养后，常规处理为给药处理、质粒转染、siRNA转染、病毒转染等，通过上述手段进行细胞模型建立或者分子机制干预，进而研究相关信号通路机制。

实验应用：

原代细胞最接近和最能反映体内生长特性，适宜用于药物敏感性试验、细胞分化等实验研究。

原代细胞常用培养方法

（1）组织块培养法：是最常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。

（2）消化培养法：采用机械法令细胞团块得以充分的分散，制成单细胞悬液进行贴壁培养。

（3）悬浮细胞培养法：对于悬浮生长的细胞，无需消化，采用低速离心，分离后直接培养。

（4）器官培养：从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离直接在体外的特定环境条件下培养。

案例图片

siRNA荧光片段转染

巨噬细胞

间充质干细胞