药物类抑菌实验

一、背景介绍

抑菌实验通常被用于检测各类药物、抗菌肽、抗菌材料等的抑菌效果检测，其应用遍布医学、食品、工业、农业等各个领域。科沿有道生物以严谨的实验设计和操作，运用进口全自动影像分析菌落计数仪进行数据分析，为客户提供客观严谨的抑菌实验结果。

二、常见方法 1）MIC和MBC测定 最低抑菌浓度（MIC）是指药物能抑制微生物生长的最低浓度，最低杀菌浓度（MBC）是指药物能杀死微生物的最低浓度。MIC和MBC都可用来评价药物抑菌或者杀菌作用的强弱，数值越小，药物的作用越强。一般采用液体培养基稀释法测定药物MIC和MBC。在一系列试管或者96孔板中，用液体培养基对药物进行稀释，使各管或者孔内的药物呈一系列递减的浓度，然后在每支管或者孔内加入一定量的试验菌。培养24~48h后，分光光度计测定各管或者各孔OD600数值，OD值与未加菌液的阴性对照孔接近的最低药物浓度即为MIC。进一步将未长菌管内的培养液移种到新鲜的琼脂培养基平板上，菌落数量少于10Cfu的最小浓度即为MBC。

2）滤纸片扩散法 滤纸折叠为后用打孔器制成直径6 mm的圆形滤纸片，高温灭菌后干燥备用。灭菌后培养基制成不含菌的平板，待平板凝固后吸取200 μL实验菌液均匀涂布于培养基表面。将准备好的滤纸片置于平板中央，吸取药物溶液100 μL，缓慢滴加于滤纸片上，以生理盐水作为对照。37 ℃培养24 h后计算抑菌圈大小。滤纸片扩散法常用于新药的初步筛选试验，用来初步判断药物是否具有抗菌作用。

3）牛津杯法 先制备含菌平板，然后在平板上放置牛津杯，在杯内加入药液，培养后观察周围细菌的生长情况，根据牛津杯抑菌圈的大小来判断药物对该菌的抑菌能力。此法适用于多种药物对一种或几种细菌抗菌能力的初步检测。

三、药敏试验执行标准 1）2021版CLSI抗微生物药物敏感性试验执行标准CLSI 文件M100-S30；

2）EUCAST 2017欧盟药敏试验标准；

3）中华人民共和国卫生行业标准WS/T639-2018。

四、案例展示