细菌同源重组改造菌株构建

细菌同源重组改造菌株构建 一、背景介绍 基因的同源重组是指外源 DNA 与受体细胞染色体DNA上的同源序列之间发生重组，并整合在预定的位置上，从而改变细菌某些遗传特性的方法。细菌中基于同源重组的基因改造技术主要有Red/ET系统同源重组法、基于自杀载体的同源重组法、基于温敏型质粒的同源重组法。 三种方法各有优缺点，科沿有道生物根据不同细菌自身特点选择不同的同源重组方法，以达到敲除、置换、插入或定点突变等基因组改造的要求。 科沿有道生物拥有丰富的细菌突变体库构建，同源重组及CRISPR基因改造经验，针对每种细菌的不同特性，开发构建同源重组改造体系，对于已经验证的同源重组构建体系，承诺不成功不收费。 二、同源重组改造体系成熟的菌种列表

三、案例展示

四、项目流程 1） 项目评估及建立同源重组敲除方案； 2） 培养客户提供的菌株，并进行16s测序验证种属； 3） 进行药物敏感性筛选，确定筛选标记基因； 4） 设计基因两侧同源臂； 5） 将抗性标记基因，同源臂构建至同源重组改造质粒系统； 6） 制备目标菌株感受态； 7） 电击转化； 8） 筛选及编辑菌株测序鉴定。 五、客户须知 需客户提供菌种名称及培养条件，全基因组测序结果，或数据库链接，目标基因及其上下游序列。 六、交付结果 1） 用于同源重组的质粒图谱； 2） 同源重组改造后的菌株； 3） 实验报告（实验步骤，测序文件，相关图片等）。