基因组学之16s、18s、ITS等扩增子测序
基因组研究包括两方面的内容:以全基因组测序为目标的结构基因组学(structural genomics)和以基因功能鉴定为目标的功能基因组学(functional genomics),又被称为后基因组(postgenome)研究,是系统生物学的重要方法。 在医学领域,基因组学能为一些疾病提供新的诊断、治疗方法,有助于医生获得更多的治疗信息并进行个性化医疗。在食品、农业、环境等研究领域,基因组
基因组研究包括两方面的内容:以全基因组测序为目标的结构基因组学(structural genomics)和以基因功能鉴定为目标的功能基因组学(functional genomics),又被称为后基因组(postgenome)研究,是系统生物学的重要方法。
在医学领域,基因组学能为一些疾病提供新的诊断、治疗方法,有助于医生获得更多的治疗信息并进行个性化医疗。在食品、农业、环境等研究领域,基因组学的应用也十分广泛。基因组学的主要工具和方法包括生物信息学,遗传分析,基因表达测量和基因功能鉴定。
一、16s、18s、ITS等扩增子测序:
扩增子测序是对特定长度的PCR产物或捕获的片段进行测序,分析序列中的变异。16S/18S/ITS等扩增子测序即通过提取环境样品的DNA,选择合适的通用引物扩增16S/18S/ITS的目标区域,通过检测目标区域的序列变异和丰度,以研究环境微生物多样性及群落组成差异。
二、技术优势:
1、通量高,适用于大量样本的特定基因组区域研究;
2、周期短,可缩短研究周期,加速临床应用及文章发表;
3、信息度高,针对感兴趣的基因组区域进行遗传变异位点的寻找,可对特定区域进行深入研究。
三、实验路线:
(1)样品准备;
(2)DNA提取与检测;
(3)PCR扩增;
(4)产物纯化;
(5)文库制备与产检;
(6)Hiseq上机测序。
四、生物信息学分析:
五、应用领域:
环境微生物、肠道微生物、发酵微生物菌群研究等。
相关推荐
细胞迁移及侵袭
一、技术原理: Transwell是一类有通透性的杯状的装置,放入培养板后,分为两室:Transwell小室内称上室,盛装上层培养液;培养板内称下室,盛装下层培养液。上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔,以此研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。Transwell检测技术服务,用于测定细胞迁移及侵袭。 二、技术优势: 简单易行:Transwell实验操作相对简单,不需要复杂的设备和
爪蟾卵母细胞电压钳检测
实验介绍: 电压钳(voltageclamp)又叫电压钳制或电压固定,该技术由Cole和Marment设计,后经Hodgkin和Huxley改进并成功地应用于神经纤维动作电位的研究。 其设计原理是根据离子作跨膜移动时形成了跨膜离子电流(I),而通透性即离子通过膜的难易程度,其膜电阻(R)的倒数,也就是膜电导(G)。因此,膜对某种离子通透性增大时,实际上时膜电阻变小,即膜对该离子的电导加大。根据
成肌诱导实验
实验介绍: 诱导肌干细胞向肌细胞定向分化进行移植是治疗DMD、心肌梗死等后天损伤等疾病的方法之一。肌卫星细胞是主要的肌干细胞,是肌再生修复的主要种子细胞,他们存在于成熟肌纤维的浆膜和基膜之间,表达早起肌系特异性银子pax3和pax7等。C2C12是由c3h小鼠骨骼肌卫星细胞永生化的细胞系,因为细胞形态和特性均已,且可以无限传代培养,因此通常用来研究肌细胞分化的模板。通常使用不同浓度的马血清通过7
MLST实验
分子实验——MLST实验 实验介绍 多位点序列分析(MLST)是在多位点酶电泳的基础上提出的以核苷酸序列为基础的一种细菌分型方法,它们都是基于同一种属的细菌均含有保守性较高的“管家基因”,但对于不同的菌株,管家基因又会存在一定的变异位点。MLST则是对特定菌株确定其管家基因,通过对管家基因的测序获得该管家基因的等位基因型,这些等位基因型按照一定的顺序排序即可得到该菌株的序列型ST。 &nbs
菌种鉴定
分子实验——菌种鉴定 实验介绍 菌种鉴定一般就只要提取基因组DNA,然后PCR扩增16s rDNA片段,上机测序之后,上GeneBank或者Eztaxon对比即可。一般序列相似度在99%以上就可以认为是同一个种细菌。 实验步骤 (1)样品DNA提取:根据DNA提取试剂盒步骤进行即可。 (2)PCR扩增:将提取的DNA作为PCR模板,引物为细菌16SrDNA,真菌ITS