石蜡切片免疫组织化学染色三步法

#石蜡切片免疫组织化学染色三步法

1、目的

规范石蜡切片免疫组织化学染色三步法的操作流程，确保染色结果的稳定性和可重复性。

2、适用范围

2.1 切片常规脱蜡至水。

2.2 3%H2O2孵育10分钟。

2.3 蒸馏水洗3分钟，3次。

2.4 抗原修复液进行抗原修复1-2次（用微波炉）。

2.5 0.01% mol/L PBS 洗3分钟，3次。

2.6 抗原修复液I滴加在切片上室温6分钟。

2.7 0.1M PBS 洗3分钟，3次。

2.8 山羊血清封闭，室温20分钟。倾去多余液体，勿洗。

2.9 滴加一抗工作液，37℃ 30分钟或4℃过夜。

2.10 0.1M PBS 洗3分钟，3次。

2.11 滴加生物素标记二抗工作液，37℃ 10-20分钟。

2.12 0.1M PBS 洗3分钟，3次。

2.13 滴加SABC，37℃ 20分钟。

2.14 用0.1M PBS配制的0.1% TWEEN-20 液洗5分钟，3次。

2.15 DAB显色，5-10分钟。

2.16 苏木素轻染30秒，分化10秒。

2.17 脱水、透明和封片。