石蜡切片免疫组织化学染色二步法

本文档为石蜡切片免疫组织化学染色二步法的标准操作程序（SOP），详细描述了从脱蜡、抗原修复、封闭、一抗孵育、二抗孵育到显色、复染、封片的完整流程，适用于病理实验室的常规免疫组化染色操作。

石蜡切片免疫组化二步法SOP病理染色

#石蜡切片免疫组织化学染色二步法

1、目的

规范石蜡切片免疫组织化学二步法染色的操作程序和方法。

2.1 切片常规脱蜡至水。

2.2 3%H2O2孵育10分钟。

2.3 蒸馏水洗3分钟，3次。

2.4 抗原修复液进行抗原修复1-2次（用微波炉）。

2.5 0.1 M PBS 洗3分钟，3次。

2.6 抗原修复液I滴加在切片上室温6分钟。

2.7 0.1M PBS 洗3分钟，3次。

2.8 山羊血清封闭，室温20分钟。倾去多余液体，勿洗。

2.9 滴加一抗工作液，37℃ 30分钟。

2.10 0.1 M PBS 洗3分钟，3次。

2.11 滴加通用型HRP多聚体二抗，37℃ 10-20分钟

2.12 0.1M PBS 洗3分钟，3次。

2.13 用0.1 M PBS配制的0.1% TWEEN-20 液洗5分钟，3次。

2.14 DAB显色，5-10分钟。

2.15 苏木素轻染30秒，分化10秒。

2.16 脱水、透明和封片。