组织切片Giemsa染色
本文档详细描述了组织切片Giemsa染色的步骤、试剂配制、注意事项及结果判定,适用于病理实验室常规染色操作。
#组织切片Giemsa染色
1. 目的
规范组织切片Giemsa染色操作,确保染色质量与结果一致性。
2. 操作程序
2.1 试剂配制:
2.1.1 盐酸乙醇液 38%盐酸0.5ml,70%乙醇99.5ml。
2.1.2 Giemsa贮备液 把60ml甘油放入250ml烧瓶中再加Giemsa染料0.75g, 然后放入56~ 58℃烤箱内过夜。将染液移出烤箱后趁热加入甲醇40ml,充分混合后棕色瓶内保存。
2.1.3 10%Triton X-100:Triton X-100 10ml,蒸馏水90ml,液体要充分混合。
2.1.4 Giemsa工作液:Giemsa 贮备液10ml, 甲醇1ml,蒸馏水40ml,10%Triton X-100 4ml。
2.1.5 1%冰醋酸水溶液:冰醋酸 1ml,蒸馏水99ml。
2.2 操作步骤:
2.2.1 切片脱蜡至蒸馏水
2.2.2 盐酸乙醇液10ml
2.2.3 充分水洗
2.2.4 蒸馏水洗
2.2.5 切片在Giemsa工作液内经微波炉(最大输出量600W的1/10) 4min
2.2.6 蒸馏水洗
2.2.7 1%冰醋酸水溶液分化数秒钟
2.2.8 95%乙醇,无水乙醇脱水
2.2.9 二甲苯透明,中性树胶封固
3.结果
菌(幽门螺杆菌)呈蓝色或淡紫色,细胞核呈蓝色,淋巴细胞胞浆呈淡蓝色或紫色。肥大细胞胞浆,嗜酸性粒细胞胞浆颗粒呈红色。红细胞呈橘黄色。黑色素颗粒蓝黑色或深绿色。
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