细胞实验
细胞生物学实验技术服务
克隆形成实验
实验介绍： 克隆形成实验是测定单个细胞增殖能力的有效方法。所谓克隆是指单个细胞在体外持续增殖6代以上其后所形成的细胞群，形成肉眼可见的克隆。通过计数得出克隆形成率，可对受检细胞的增殖潜力作定量分析。 实验应用： 常用于抗肿瘤药物敏感性测定、基因治疗、肿瘤放射生物学等方面的研究。 实验步骤： （1）取处理好的细胞，将细胞悬液稀释，以300个细胞密度接种于6孔板中，均匀
CCK8/MTT
实验介绍： CCK8实验和MTT实验都是常用的细胞增殖试验方法，用于评估细胞的生长和增殖情况。CCK8实验其原理是WST-8被线粒体内的脱氢酶还原成高浓度水溶性的橙黄色甲臜产物，其颜色的深浅和细胞增殖形成正比，和细胞毒性成反比，因此通过CCK8试剂反应后的溶液通过酶标仪检测吸光值后即可计算相对细胞增值情况。同理MTT实验也是脱氢酶可以是试剂盒中的MTT还原成蓝紫色的结晶甲臜，通过加入DMSO溶解
流式细胞周期
实验介绍： 细胞周期（cell cycle)：指细胞从前一次分裂结束起到下一次分裂结束为止的活动过程，通常由G0/G1期、S期、G2期和M期组成。 G0/G1期：有丝分裂发生，细胞分裂成两个细胞，进入下一个细胞周期，或者进入静止期（G0期），而G0期从DNA含量上无法与G1期区分，细胞开始RNA和蛋白质的合成，但DNA含量仍保持二倍体。 S期：DNA开始合成，细胞核内DNA的含量
流式细胞凋亡
流式细胞凋亡 实验介绍： 细胞凋亡通常称为细胞程序性死亡，是由基因控制的主动性细胞死亡过程，Annexin V是检测细胞凋亡的灵敏指标之一。它是一种磷脂结合蛋白，可以与早期凋亡细胞的胞膜结合，而细胞质膜的改变是细胞发生凋亡时最早的改变之一。 在细胞发生凋亡时，膜磷脂酰丝氨酸(PS)由质膜内侧翻向外侧。Annexin V与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，因而与细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸结合。由于在发
ROS活性氧检测
实验介绍 活性氧（Reactive oxygen species, ROS）包括超氧自由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化物等，参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。DCFH-DA(2，7-Dichlorofuorescin Diacetate)探针是迄今最常用、最灵敏的细胞内活性氧检测探针。DCFH-DA 本身没有荧光，可以自由穿过细胞膜，当其进入细胞内后，会被细
荧光素酶实验
实验介绍： 荧光素酶报告基因检测是以荧光素（luciferin）为底物来检测萤火虫荧光素酶（Firefly Luciferase）活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中，会发出生物荧光（bioluminescence），可通过荧光测定仪设备测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光，常应用于miRNA靶基因验证及
耐药细胞株构建
实验介绍： 耐药细胞株是通过适当时间药物的诱导使某种肿瘤细胞系对此药物敏感度降低，细胞株的耐药性是通过检测IC50的比值，来判断细胞耐药程度。不同细胞不同药物所能构建成功的耐药株是不同的，也有部分细胞或者药物是无法耐药的，因此耐药细胞株的构建是一个完全摸索的过程，常规预计需要3-12个月左右。 实验应用： （1）药物研发：耐药细胞株可以用于筛选和评估新药物的疗效。通过将新药物
爪蟾卵母细胞电压钳检测
实验介绍： 电压钳（voltageclamp）又叫电压钳制或电压固定，该技术由Cole和Marment设计，后经Hodgkin和Huxley改进并成功地应用于神经纤维动作电位的研究。 其设计原理是根据离子作跨膜移动时形成了跨膜离子电流（I），而通透性即离子通过膜的难易程度，其膜电阻（R）的倒数，也就是膜电导（G）。因此，膜对某种离子通透性增大时，实际上时膜电阻变小，即膜对该离子的电导加大。根据
细胞成脂诱导实验
实验介绍： 干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞，未充分分化尚不成熟，在一定条件下可以分化成多种功能细胞。脂肪干细胞是从脂肪中分离得到的多分化潜能的干细胞，通过一定条件培养可以生长为成熟的脂肪细胞产生脂滴，为科研工作者研究脂肪相关课题提供良好的细胞模型，目前此模型应用广泛，相关机制研究也非常多。 目前以发表研究发现，脂肪间充质干细胞诱导成脂过程的方法有2种： （1）地塞米松、胰岛素以及I
成肌诱导实验
实验介绍： 诱导肌干细胞向肌细胞定向分化进行移植是治疗DMD、心肌梗死等后天损伤等疾病的方法之一。肌卫星细胞是主要的肌干细胞，是肌再生修复的主要种子细胞，他们存在于成熟肌纤维的浆膜和基膜之间，表达早起肌系特异性银子pax3和pax7等。C2C12是由c3h小鼠骨骼肌卫星细胞永生化的细胞系，因为细胞形态和特性均已，且可以无限传代培养，因此通常用来研究肌细胞分化的模板。通常使用不同浓度的马血清通过7