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分子实验

分子生物学实验技术服务

31 篇文章

真菌基因编辑介绍

一、背景介绍:真菌是真核生物中一支庞大而种类繁多的物种,目前已知的约10万多种,自1996年酿酒酵母基因组被测定以来,越来越多的真菌基因组被解析和公布,测序获得大量功能未知的真菌DNA序列,鉴定这些基因的功能,解析这些序列的生物学特性已经成为后基因组时代的研究热点。科沿有道生物可运用CRISPR/Cas9基因编辑、T-DNA插入、同源重组、RNA干扰等多种技术协助科研用户在真菌中实现基因功能探索,

简化基因组测序简介

一、技术简介:简化基因组测序(Reduced-Representation Genome Sequencing, RRGS)是对部分基因组进行序列测定。它是指利用生物信息学方法,设计标记开发方案,富集特异性长度片段,应用高通量测序技术获得海量标签序列来代表目标物种全基因组信息的测序方法。 二、技术优势:1、方案灵活:可根据每个客户的研究目标和内容灵活定制研究方案; 2、重复性高:不经过片段大小

腺病毒包装

实验简介 腺病毒是一种无包膜的线状双链DNA病毒。除了一些抗腺病毒感染的淋巴瘤细胞,腺病毒系统可以在任何哺乳动物细胞中高效瞬时表达。感染宿主细胞时,病毒基因组及其携带的外源基因独立于宿主基因组外游离表达,无插入突变性,安全性高。腺病毒载体的外源基因装载量较大,表达速度快,可获得高滴度的病毒。 实验步骤 1. 构建目的基因腺病毒载体 2. 采用 PacI 消化纯化的质粒。 3. 消化好

ELISA检测

实验原理 ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与

Western Blot 检测

技术原理 经过PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。 服务流程 结果展示 注意事项 1

免疫共沉淀

技术原理 以抗体和抗原之间的专一性作用为基础用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X,那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。 服务流程 结果展示 注意事项 1、IP样本用量较大,提供样本前需提前沟通;另外,样本

凝胶迁移实验

技术原理 一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温,在非变性的聚丙烯凝胶电泳上,分离复合物和非结合的探针。DNA-复合物或RNA-复合物比非结合的探针移动得慢。同位素标记的探针依研究的结合

miRNA、mRNA、iTRAQ整合分析

一、技术简介:miRNA是一类长度约20-24nt的具有调控功能的非编码RNA,在生物体内,miRNA主要通过与靶基因mRNA结合,介导靶mRNA的翻译抑制(动物)或剪切降解(植物),而蛋白质作为mRNA的翻译产物,其表达量也会受到影响。通过研究miRNA-mRNA-蛋白质之间的相互作用关系,可以系统的研究基因表达调控机制。 二、技术路线: 三、分析内容: 1.三组学关联

EMSA(凝胶迁移或电泳迁移率实验)

一、技术介绍:凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,适用于转录因子与启动子相互作用的验证性实验,主要是验证蛋白质与特定核酸序列的结合特性,从而间接推断已知蛋白质的靶序列或已知序列的结合蛋白质分子。可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于

原位杂交服务简介

原位杂交是指用特定探针定位、检测DNA、RNA的一种有效的实验方法,通过把特点序列克隆到特殊载体上,通过转录酶反转一条天然的基因探针,将探针和切片样品进行杂交,通过一系列显色方法,来进行基因定位。★ 服务内容: 1.普通原位杂交: 2.荧光原位杂交 ★ 需要提供的信息:1.组织样本,细胞样本,石蜡切片,冰冻切片以及细胞爬片,涂片等。 2.检测目标基因序列和引物序列。