小动物的解剖和检查

本文档为小动物解剖和检查的标准操作程序(SOP),涵盖解剖前准备、解剖步骤、器官检查、样本采集及记录规范,适用于病理学常规操作。

病理解剖小动物SOP标准操作程序

#小动物的解剖和检查

1. 目的

规范小动物解剖和检查的技术操作。

2. 适用范围

大鼠、小鼠、地鼠、豚鼠等小动物的解剖操作。

3. 解剖注意事项

3.1发现动物死亡后应应及时剖检,以免动物组织出现死后自溶。

3.2 实验动物批量解剖时,应先从对照组开始,然后按高、中、低剂量组的顺序,依次剖检。

3.3 解剖、观察应全面、细致。

动物解剖与脏器病理学检查,是同时进行。检查内容包括脏器的位置、形状、大小、重量、色泽、被膜、硬度、有无分泌物、出血、肿物、破溃和切面异常改变等。将所观察和测量的结果进行详细记录,作为以后取材、光镜检查和最终结果分析的重要依据。在诱癌实验中,对肿物的个数、大小、重量、形状、发生器官等异常变化,要分别记录,必要时绘图表示或拍照保留原始资料。

3.4 动物处死:按照麻醉及处死的SOP进行操作。在同一个专题中,实验动物的处死应采用同一种方法。

3.5常规解剖、观察顺序:体表→皮下组织→皮肤和乳腺的取出→唾液腺/颌下腺检查和取出→暴露腹腔、胸腔及脏器的检查→胸骨的取出→气管、甲状腺、甲状旁腺和食管的检查和取出→胸腔脏器的取出与检查→腹腔脏器的取出与检查→坐骨神经和注射局部的取出和检查→眼球的取出→脑的取出和检查→脊髓的取出和检查。有时因实验设计的要求,其解剖顺序可发生改变,或增减解剖取材项目。如要重点观察药物对中枢神经系统的毒性损伤,则应重点注意中枢神经系统剖检。

4. 解剖操作程序及标本留取

4.1 解剖前(死亡或处死动物)核对课题号、动物号、组别、性别、给药途径,称量体重,记录动物剖检日期。

4.2 外观及体表检查:将动物仰卧于解剖台上,自前而后检查头、面、颈、胸腹、四肢和外生殖器等。

外观:动物营养状态,有否显著消瘦或肥胖。四肢有无畸形。

全身皮肤:毛色是否光亮,有无脱毛、出血、皮疹、结节、感染或其它异常。

眼:眼睑周围是否有分泌物,眼结膜有无充血或出血,角膜有无混浊或溃疡等,观察瞳孔大小。

口腔:口唇周围有无疱疹、溃疡等,口腔内有无出血、感染,有无异常分泌物等。

耳、鼻:有无分泌物及其性状。耳廓及鼻翼有无异常。

外生殖器:外阴部有无异常,有无分泌物及其性状。

给药局部:有无肿胀、充血、出血、坏死、化脓感染或溃疡等,尾部有无肿胀或坏死等。

4.3剪开皮肤及皮下检查:体表检查后,用剪刀从耻骨联合部向前至下颌处,分离或剪去腹部、胸部及颈部皮肤,必要时可分离其它部位皮肤。观察皮下有无出血、肿块等病理改变。留取病变部位标本。

4.4 皮肤和乳腺的取出:以乳头为中心,连乳头在内取一块皮肤及皮下组织。

4.5唾液腺/颌下腺:分离颈部皮肤,即可暴露唾液腺及淋巴结。观察大小、色泽等。摘取唾液腺。

4.6 剖开腹腔及胸腔

4.6.1剖开腹腔:在上腹部正中用镊子夹起肌膜和腹膜,剪切开一小口,观察有无气体或液体排出(胃肠穿孔)。然后将剪子小心伸入切口内,略向上挑起,贴着腹膜剪开,避免剪破肠管等,从耻骨联合部向上剪至胸骨剑突处,然后再沿左右肋弓下缘,向脊柱方向切断腹壁肌,暴露腹腔器官。检查脏器位置,腹腔内有无积液、积血等及其量(根据实验要求可做涂片)。大网膜及腹膜颜色,是否光滑、有否充血、出血、炎性渗出物附着或与肝、肠等粘连。检查腹腔内实质性脏器的颜色、质地是否正常。

4.6.2剖开胸腔:用镊子提起剑突,剪断胸骨两侧肋软骨,从肋弓剪至锁骨关节及颈部肌肉,剪断横膈与胸骨的连结,暴露出胸腔的脏器、气管及食道。注意刀尖勿损伤肺组织及胸腺。检查脏器位置,胸腔有无积液,如有应记录液体性状和量,必要时作涂片检查及细菌培养;胸膜有无增厚,与肺膜有无粘连。心包腔内有无积液和粘连,心包有无增厚,是否与肺膜粘连。

4.7 胸腔脏器的取出与检查

4.7.1取出胸骨:检查有无异常,用剪刀剪断与其相连的两侧肋软骨及两端剑突和多余组织,取下胸骨。

4.7.2气管、甲状腺、甲状旁腺和食管的取出及检查:检查后,气管、甲状腺、甲状旁腺和食管可一起取出,剥离喉及气管上端的前面及其两侧软组织,在喉下方、气管上端,约4-5气管软骨环的腹外侧,气管的左右各见到一个淡褐色扁椭圆的甲状腺的侧叶。将其连一段气管及其后的食管一同取出后投入固定剂中固定。

4.7.3胸腺的检查与取出:位于胸骨后,前上纵隔,呈灰白色,分叶状,质地较脂肪组织硬。全部取出,检查有无出血、萎缩或肿大。注意与其周围的脂肪组织等结缔组织分离。

4.7.4心脏的检查与取出:观察心脏大小、形态,心外膜有无出血,用镊子轻夹心包,剪断与心脏相连的大血管(保留左右心耳),分离心脏,称重后,将心脏整个投入固定剂中固定。

4.7.5肺的检查与取出:首先用镊子轻轻夹住左侧肺大叶,剪断与之相连的气管以及结缔组织,分离肺大叶。去除与右侧肺相连的气管及与胸后壁相连的结缔组织,分离右肺。并检查左肺和右肺的表面有无出血或渗出物附着、有无实变、脓肿、结节或肿瘤,及以上病变的分布和范围。称重后,投入固定剂中固定。

4.8 腹腔脏器的取出与检查

取出腹腔脏器的一般顺序是:先取肝脏、脾、胰腺(胰尾),然后依次为左肾上腺、左肾、右肾上腺、右肾、膀胱、前列腺、睾丸(连附睾)、卵巢、子宫、胃、十二指肠、胰腺(胰头)、空肠、回肠、结肠、肠系膜淋巴结、直肠。

4.8.1肝的取出和检查:用镊子夹住膈肌向上提起,切断肝的横膈面韧带以及血管;再用镊子夹住肝韧带提起肝脏,剪断肝十二指肠韧带,和其中的门静脉和肝动脉等,即可将肝取出。检查肝的形状、色泽、有无结节、瘀血、出血等。称重后,必要时用刀沿肝左右直径表面最凸处向肝门作第一个切面,然后再作2-3个平行切面,检查肝切面的色泽、肝小叶的结构等。全部或部分肝脏投入固定液中固定。

4.8.2脾的取出和检查:用镊子夹住脾门的血管等,剪断血管,将脾取出。检查脾大小、厚薄、软硬度、色泽、脾边缘状态、包膜有无增厚、皱纹或破裂(常见腹腔出血)、有无出血、坏死或脓肿。

4.8.3胰脏的取出和检查:在取出胰之前先检胰脏周围组织有无出血及脂肪组织坏死,检查其色泽、有无出血坏死,可用手触摸是否有结节。

4.8.4肾上腺的取出和检查:在左侧腹后壁左肾上端,将左肾上腺取出,小心剥离脂肪。右肾上腺在右肾上端。检查其形态、大小、色泽等。

4.8.5肾脏的取出和检查:将肾周围脂肪分离后将肾提起,剪断肾门的血管及输尿管,即可取出。检查肾大小、颜色、表面有无异常。为区别左右肾脏,将右肾从肾门向肾外缘作一横切口。

4.8.6睾丸及附睾取出和检查:提拉精索,将睾丸连同附睾一同提出,割断其下端与阴囊相连的睾丸韧带,将睾丸取出,将睾丸和附睾分离,剔除脂肪,检查其大小,称重后,整体投入固定剂中固定。

4.8.7卵巢和子宫的取出及检查:在子宫颈和阴道之间剪断,沿双子宫向上分离并切断周围软组织及韧带,找到卵巢,分离周围脂肪组织,将卵巢与子宫一同取出。检查其大小、形状、色泽。剪断卵巢与子宫的连接,分别称重后放入固定剂中固定。

4.8.8膀胱/前列腺的取出和检查:用镊子轻夹膀胱底部,用剪刀剪断膀胱颈与尿道的连接,取出膀胱及前列腺(雄性),检查尿液性状。观察其大小、色泽、表面有无结节。然后投入固定剂中固定。

4.8.9 肠系膜淋巴结的检查及取出:检查肠系膜,肉眼见为灰白色结节,被脂肪包裹,轻捏质地稍硬,检查淋巴结大小、色泽。将多个淋巴结及其周围的脂肪组织一同取出。

4.8.10 胃和大小肠的取出和检查:分别检查胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠及直肠等器官有无出血、充血、结节、坏死及粘连等。然后胃肠分别取材,前胃剪一小口便于固定液进入,十二指肠、胰腺(胰头)可取在一起,依次分别剪取2~4cm空肠、回肠、结肠(肠系膜淋巴结)、直肠。必要时由胃贲门部沿胃大弯将胃剪开,检查胃内容物及胃粘膜有否充血、出血、炎性变化、摩烂、溃疡或穿孔,有否肿物。必要时剪开十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠和直肠,观察肠腔内容物及粘膜。

4.9坐骨神经的取出:大腿后侧由腘窝向坐骨大孔方向剪开皮肤和肌肉,暴露坐骨神经,神经1-2cm和部分肌肉一起取出固定。

4.10给药局部组织取出及检查:用剪刀将给药局部组织取下。检查有无出血、化脓、坏死等。

4.11 眼球的取出:剥离眼球周围的软组织,取出眼球。

4.12脑、颈髓、视神经和垂体的取出与检查:将动物俯卧,沿顶部正中线剪开头、颈部皮肤,分离皮下组织并向两侧拉开,充分暴露头颅顶和颈部。剥离附着肌肉。用骨钳尖端剪开并去掉颅骨,暴露大脑,继之用骨剪沿枕骨大孔将颈部脊椎管剪开2~3cm长,并将颈椎管周围骨组织剪去,暴露颈髓。观察硬脑膜有无充血、出血、血栓或静脉炎等异常变化。剪去硬脑膜,剪断前端大脑镰,之后左手将大脑朝下,靠重力使大脑前端露出与颅底的间隙,右手依次剪断与大脑相连的视神经、脑神经、颈内动脉及脑垂体蒂,剪开两侧小脑天幕,剪断与颈髓相连的颈椎动脉和颈神经,将整个脑及颈髓一并取出,剪下颈髓,全脑称重。再分离蝶鞍处的包膜,取出垂体,将垂体贴于滤纸片上或包埋盒中,投入固定剂中固定。

4.13胸髓、腰髓的取出:从枕骨至骶骨沿背部正中线(即棘突的上部)将皮肤剪开,将脊柱与肋骨连结剪断,将脊柱周围软组织剥离干净,注意保留胸主动脉,然后将第一颈椎和骶骨下端各自剪断,则取出整个脊椎,待固定后再分别取出胸髓及腰髓

5. 解剖后核对

解剖者解剖完成后,填写动物病理解剖检查与标本留取记录表,由另一人核对动物号和各脏器后,将脏器移交给称重人员。称重后选取标本固定。

解剖者将动物尸体(如有动物编号可将其放入动物腹腔内)装入专用的医疗废弃物袋中。

5. 附表

附表1动物病理解剖检查与标本留取记录表。

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