脂肪染色方法

1、目的

规范脂肪染色的操作程序和方法。

2、操作程序

苏丹-Ⅲ染色法  

  

2.1 染液配制

苏丹-Ⅲ染液：苏丹-Ⅲ 0.15g，60-70%酒精 100 ml，将染料溶于60-70%酒精中，临用前过滤，密闭保存。

2.2 染色步骤

2.2.1 冰冻切片5～10 µm。漂于水中或粘贴在载玻片上。

2.2.2 蒸馏水洗。

2.2.3 Harris苏木精液 1 min。

2.2.4 水洗返蓝。

2.2.5 蒸馏水洗。

2.2.6 70%酒精迅速洗,约20～30秒。

2.2.7 苏丹-Ⅲ液置于56℃温箱内浸染 30 min。

2.2.8 70%酒精分化数秒。

2.2.9 切片入蒸馏水。

2.2.10 用滤纸吸干切片上的水分，待干。

2.2.11 甘油明胶封固。

三、结果

脂类物质呈红色，细胞呈蓝色，粘液物质染色。

四、注意事项

4.1 在石蜡包埋组织处理过程中，要用一些有机溶剂，所以石蜡切片不能用于脂类染色，通常用冰冻切片或炭蜡包埋切片，切片厚5～15 µm。

4.2 切片选用中性甲醛、钙甲醛或锇酸固定液固定。单纯甲醛固定会丢失一些磷质。脂类物质不溶于水，易溶于有机溶剂。所以显示脂质时不能用含有有机溶剂的固定液固定。