特色实验
特色实验技术服务
透射/扫描电镜送样注意事项
(一)透射电镜收样要求 一、组织样本: (1)组织固定,体积尽可能小,一般要求1立方毫米大小,如果容易漂浮的组织样本,在管口用棉花塞住保证组织浸泡于2.5%戊二醛中,组织太大固定不充分,容易造成照片模糊或者结构溶解。(2)组织取材要迅速,在几分钟内保存于戊二醛,保持结构完整性。(3)组织在戊二醛中4℃保存1个月以内进行实验,不要存放太长时间。二、细胞样本: 样本在收集后一定要肉眼
膜片钳技术简介
一、技术简介:膜片钳技术是一种细胞内记录技术,是研究离子通道活动的最佳工具,也是应用最广泛的电生理技术之一。该技术通过施加负压将微玻管电极(膜片电极或膜片吸管)的尖端与细胞膜紧密接触,形成GΩ以上的阻抗,使电极开口处的细胞膜与其周围膜在电学上绝缘。被孤立的小膜片面积为μm量级,内中仅有少数离子通道。玻璃微电极中含有一根浸入电解溶液中的导线,用于传导离子。在此基础上对该膜片施行电压钳位(即保持跨膜电
电生理技术简介
一、技术简介: 用电生理仪器、电极、电压钳(voltage clamp)及膜片钳 (patch clamp) 技术等记录或测定整体动物或离体器官组织、神经和细胞离子通道等的电位改变、传导速度和离子通道的活动的技术即电生理技术。引导生物电的电极可分为大电极和微电极两类。大电极记录的是许多细胞(如一个器官)的电活动综合而成的生物电,如心电、脑电、肌电等。微电极尖端细小(直径<1微米),也可大至几微米
动物药效学实验技术服务简介
(一)技术简介: 动物实验模型因其较体外实验更能模拟人类的生理和病理条件,在科研上,获得的结果具有更强的说服力。 动物模型是生物医学研究过程中建立的具有人类疾病模拟性表现的动物疾病材料,是促进生物医学发展的一种重要的途径,在疾病的发生和发展过程中发挥着至关重要的作用。 科沿有道动物药效学实验提供常规动物模型,用来检测药物的有效性。包括:皮下异种移植瘤模型构建,皮下异种
荧光素酶报告基因检测问题解答
一、荧光素酶报告基因检测主要有哪些用途? a.启动子结构分析,将启动子区域序列(通常2k左右)进行分段截短,或对特定位点进行突变,再分别构建入luciferase报告载体,检测其启动子活性。 b.启动子SNP分析,一些基因的启动子区域存在单核苷酸多态性,可运用荧光素酶报告系统分析其相对活性。 c.验证特定转录因子同其调控序列的作用,将该序列(通常为启动子区域)插入报告基因载体,同
酵母杂交技术常见问题解答
一、如何根据研究需求选择酵母单杂还是双杂? 1) 酵母双杂交系统主要用于研究蛋白和蛋白之间的互作; 2) 酵母单杂交系统主要用于研究DNA和蛋白之间的互作。 二、酵母单双杂通用文库是什么意思? 科沿有道通过文库构建得到次级文库质粒,将文库质粒转化到Y187酵母宿主中,得到两种文库类型,可同时满足酵母单双杂公转筛库或酵母单双杂matting筛库。 三、酵母杂交技术服务具
MSP甲基化检测简介
一、实验原理: 甲基化特异性的PCR是一种灵敏度高且操作相对简单的甲基化研究方法。重亚硫酸盐处理DNA后,基因组DNA发生的由甲基化状态决定的序列改变。随后进行引物特异性的PCR。该方法引物设计是关键。MSP中设计两对引物,即一对结合处理后的甲基化DNA链(引物对M),另一对结合处理后的非甲基化DNA链(引物对U)。检测MSP扩增产物,如果用引物M能扩增出片段,则说明检测位点存在
BSP甲基化测序服务简介
亚硫酸氢盐处理后测序(bisulfite sequencing PCR,BSP)法是检测基因甲基化的经典方法,其原理为:用亚硫酸氢钠修饰处理基因组DNA,所有未发生甲基化的胞嘧啶(C)被转化为尿嘧啶(U)而甲基化的胞嘧啶则不变。 基因组DNA经亚硫酸盐处理后,设计BSP引物扩增目的片段,此时尿嘧啶(U)全部转化为胸腺嘧啶(T),最后对PCR产物进行测序就可以判断CpG位点是否发生甲基化。
外泌体相关研究简介
外泌体(exosome),特指直径在40-100nm的盘状囊泡。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。现已证实可以分泌外泌体的细胞有:肥大细胞、淋巴细胞、树突状细胞、肿瘤细胞、间充质干细胞等。 外泌体在免疫中抗原呈递、肿瘤的生长与迁移、组织损伤的修复等生理病理上起着重要的作用。同时,不同细胞分泌的外泌体具有不用的组成成分和功能,可作为疾
流式细胞术各项检测介绍
一、细胞周期检测: 检测要求:预冷的70%酒精固定的单细胞悬液:一周内均可检测。 未固定的新鲜细胞:2h内检测。 二、细胞凋亡检测: 检测范围:单细胞悬液。 样本形式:新鲜制备的单细胞悬液。 三、细胞增殖检测: 检测范围:人EDTA抗凝全血、悬浮细胞,要求样本无菌。 四、